himac APPLICATION

No.88 JULY 1999

1L×6本のカーボンファイバーロータでの分離時間の検討

機種：CR7形大容量冷却遠心機

R7AF2形カーボンファイバー製アングルロータを用いた分離時間の検討

CR7形 大容量冷却遠心機に使用できる6LクラスのロータはR5S2形スイングロータのみでしたが、1L×6本、合計約6LのR7AF2形アングルロータが開発されました。しかもこのロータはカーボンファイバーを主材料として製造されているため、これまでのR5S2形スイングロータの質量が約28Kgと非常に重いのに対し、約12Kgと半分以下の質量で非常に軽く操作性に優れたものです。
さらに標準付属の1000PPボトル(2)は、従来の1000PPボトルと異なり、O-リングシールタイプのキャップを採用したため密封性が高く、しかも堅牢なボトルで試料を満杯(最大実容量：910ml）入れることも、それ以下の任意の量で使用することもできる使い易いものです。
最高回転速度は7,000rpm、最大遠心加速度11,400xgと培養液からの集菌操作、培養上清中のタンパク質の硫安分画などに用いることができます。ここでは大腸菌の分離条件について検討しました。 （ただし、4ºCでの使用は最高回転速度が6,000rpmとなります）

分離条件（大腸菌の分離：CR7形大容量冷却遠心機使用）

• 回転速度	時間	温度	加速	減速
  7,000rpm	9分	15ºC	9	9

  

解説

通常、大腸菌培養液からの集菌のための遠心分離条件は、アングルロータに500ml用ボトルを使用して4,000～6,000xg、10～15分程度といわれています。このことからR5S2形スイングロータやR7AF2形カーボンファイバーロータを使用した場合の分離条件は下表の通りとなります。ここでR5S2形スイングロータの場合、加速および減速の時間を含めると、遠心時間は約30分と予想されます。
しかし、このR7AF2形カーボンファイバーロータを使用すると、遠心時間は加減速時間を含めても約15分、スイングロータの約1／2の時間での分離が可能となります。この時、4℃での分離が必要とされても、回転速度6,000rpmで加減速時間を含めて約18分、スイングロータの約60％の時間での分離ができます。
しかもロータの重さが約12kgと比較的軽いため、スイングロータの時にはほとんど不可能であったロータ交換が可能となりました。 なお、このR7AF2形カーボンファイバーロータ用の1Lボトル(1000PPボトル(2)、実容量：910ml)は 実容量以下の任意の量でも使用できますので、非常に使い勝手の良いロータです。