himac APPLICATION

No.64 APRIL 1994

分離用小形超遠心機によるリポタンパク質の分離

機種：CS120FX形分離用小形超遠心機 / S120AT3アングルロータ

S120AT3アングルロータによりヒト血清からリポタンパク質を迅速に分離した例

1. 使用機種

遠心機：CS120FX形　himac 分離用小形超遠心機
ロータ：S120AT3アングルロータ
チューブ0.5PCチューブ

2. 分離結果

実験は、目視により観察できるよう試料にFAT RED 7Bを添加して行ないました^*1)

(1) 試料1（LDL、HDLの沈降）

(2) 試料2（LDLの浮上）

3. 試料調製法

(1) 試料1（LDL、HDLの沈降）
血清100μlに、ρ＝1.006（g/cm³）の密度液（0.15M NaCl，0.3mM EDTA，pH7.4）100μlを加え、よく混合した後0.5PCチューブに移します。

(2) 試料2（LDLの浮上）
血清100μlに、ρ＝1.12（g/cm³）の密度液（15％(w/w)Kbr）100μlを加え、平均密度を1.063（g/cm³）とし、よく混合した後0.5PCチューブに移します。

4. 解説

臨床検査を行なうことを目的とした血清（漿）リポタンパク質の分離には、微量の試料を多検体処理することが必要です。
この場合の例として、先にRP100AT3アングルロータ（アプリケーションNo.28）、およびRP100AT2アングルロータ（アプリケーションNo.29）を用いた例を紹介しました。ここでは、さらに高遠心力が得られるロータが開発されましたので、従来よりも短時間化された例を示しました。（従来（RP100AT2アングルロータ）：２時間→新ロータ（S120AT3アングルロータ）：1.5時間）
なお、試料量はチューブ１本あたり最大500μlまで処理できます。この場合の遠心時間は120,000rpmで3.5時間となります。

（参考文献）

1. T.J.Bronzert and H.B.Brewer，Clin．Chem.，23，2089（1977）．